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La producción de micelio generalmente comienza unos 80 días antes de la inoculación de las bolsas de fructificación. Cada micelio madre puede utilizarse para propagar 5 frascos de micelio, con un tiempo de cultivo de unos 30 días. El proceso de producción de micelio es el siguiente: preparación de ingredientes → embotellado y esterilización → enfriamiento e inoculación → cultivo.
(1) Fórmulas del medio de cultivo principal
① Medio de cultivo de aserrín: Aserrín de hojas anchas 7-8%, salvado de trigo 2-0%, azúcar 1%, yeso 1%, pH 6,5-7.
② Medio de cultivo de cáscara de semilla de algodón: cáscara de semilla de algodón 7-8%, salvado de trigo 2-0%, azúcar 1%, yeso 1%, pH 6,5-7.
(2) Selección de botellas de desove: comúnmente se utilizan botellas de desove estándar de 500 ml.
(3) Mezcla, ebullición (envasado), esterilización y enfriamiento
1. Mezcla: Mezcle el material y el agua uniformemente mediante métodos convencionales. 2. Embotellado: Después de lavar y secar los frascos de cultivo, llénelos con medio de cultivo hasta el hombro. Limpie el interior y el exterior de los frascos y cúbralos con un tapón con orificios de ventilación.
③ Esterilización y enfriamiento: El control de la temperatura es crucial durante la esterilización. Se deben utilizar tanques de esterilización de alta presión para la esterilización centralizada del medio de cultivo. Mantener una presión de vapor de 0,15 MPa durante 2 horas logrará una esterilización completa. Al enfriar los frascos de cultivo esterilizados, ventile lentamente el gas para bajar la temperatura. Una vez que la temperatura dentro del tanque de esterilización baje a 60 °C, trasládelos a una cámara de enfriamiento para su enfriamiento completo.
(4) Inoculación: Inocular en una caja o sala de inoculación. Pasos de la inoculación: Primero, colocar las botellas de cultivo enfriadas en la caja de acuerdo a su capacidad, dejando suficiente espacio para la transferencia de la botella. Colocar los tubos de cultivo madre y el equipo de inoculación necesario juntos para la desinfección previa a la inoculación. Después de encender el desinfectante de niebla de gas, sellar y desinfectar rápidamente la caja (sala). Durante la inoculación, en condiciones asépticas, cortar el medio de cultivo inclinado del cultivo madre en 5 trozos. El primer trozo debe cortarse más largo porque el medio de cultivo es delgado y se seca fácilmente, lo que afecta el crecimiento micelial. Luego, transferirlo junto con el medio de cultivo a la botella de cultivo original, inoculando un trozo por botella y asegurándose de que esté cerca del orificio de inoculación para facilitar la germinación del trozo de cultivo madre. Después de la germinación, el trozo de cultivo madre debe plantarse lo antes posible.
(5) Cultivo. La sala de cultivo original debe estar limpia, seca y fresca. La temperatura interior debe mantenerse entre 23 y 25 °C, la humedad relativa del aire interior entre el 40 % y el 50 % y el aire interior debe mantenerse fresco. Las ventanas de la sala de cultivo original deben cubrirse con un paño negro para evitar que el micelio se vea afectado por la luz, lo que provocaría la evaporación de la humedad del sustrato y la aparición prematura y el envejecimiento de los primordios. Durante el cultivo original, se deben revisar con frecuencia los frascos de cultivo para detectar la contaminación por otras bacterias. Una vez detectada la contaminación, los frascos deben desecharse a tiempo. El cultivo original generalmente puede alcanzar su máximo desarrollo en 30 días.
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