Producción de micelio de hongos shiitake

La producción de micelio de hongo shiitake incluye tres etapas: cultivo de micelio madre, cultivo de micelio primario y cultivo de micelio. El micelio madre debe ser una cepa superior que haya sido sometida a ciertas pruebas de fructificación e identificada; es un micelio de probeta, también conocido como micelio primario. El micelio primario se propaga a partir del micelio madre y se inocula en aserrín o medio de cultivo granular; también se conoce como micelio secundario. El micelio se propaga a partir del micelio primario inoculándolo en medio de cultivo de aserrín para abastecer las necesidades de producción a gran escala; también se conoce como micelio terciario. Cada cultivador de micelio debe presupuestar y planificar sus pedidos de micelio con antelación de acuerdo con su escala de producción real para evitar retrasos en el ciclo de producción.

Aislamiento de engendro
El aislamiento de micelios de hongos shiitake se puede lograr mediante el aislamiento de tejidos y de esporas. El aislamiento de esporas se utiliza generalmente para la selección de micelios, mientras que el aislamiento de tejidos se utiliza con mayor frecuencia en la producción. Los métodos específicos para el aislamiento de tejidos se describen a continuación.

(1) Preparación del equipo y del medio de cultivo
Bisturí o cuchillo de disección, aguja de inoculación, lámpara de alcohol, algodón, alcohol al 75% y medio de papa y dextrosa.

(2) Selección de Semillas de Hongos: Seleccione setas de setas de troncos de sustrato con buena viabilidad micelial, fructificación normal y un patrón de crecimiento dominante. Elija cuerpos fructíferos de setas frescas, grandes, redondos, de pulpa gruesa, con tallos cortos y delgados, de color oscuro, con sombreros cerrados, acordes con las características varietales y con 6-7 partes maduras.

(3) Desinfección de las setas: Retire los restos superficiales, corte la porción de medio de cultivo en la base del tallo y desinfecte la superficie de las setas con un algodón empapado en alcohol al 75 %. A continuación, transfiera el equipo de separación y el medio de cultivo a la caja de inoculación y realice la desinfección habitual antes de la separación.

(4) Separación de los bloques de tejido: Con las manos desinfectadas, corte el tallo por la mitad desde la base hacia arriba. Use un cuchillo afilado para cortar el bloque de tejido ligeramente por encima de la unión del tallo y el sombrero. Luego, use una aguja de inoculación o pinzas para transferir el bloque de tejido cortado al medio de cultivo inclinado, ligeramente dentro del centro. (5) Cultivo: Coloque los tubos de ensayo inoculados con los bloques de tejido a una temperatura constante de 25-27 °C. Generalmente, después de 48 horas, los bloques de tejido comienzan a recuperarse, con micelios de color blanco grisáceo creciendo a su alrededor que colonizan y se extienden en el medio de cultivo. Cuando los micelios crezcan aproximadamente 1-2 cm en el medio de cultivo, seleccione tubos de ensayo con micelios robustos, córtelos en pequeños trozos con una herramienta de inoculación y transfiéralos a un nuevo medio de cultivo inclinado. Después del cultivo, estos se convierten en el cultivo madre.

(6) Inspección: La inspección de calidad del cultivo madre es fundamental. El cultivo madre obtenido mediante el método de aislamiento de tejido está compuesto por micelios binucleados. Al microscopio, cada célula del micelio posee dos núcleos y presenta conexiones de pinza en los septos celulares. Cuantas más conexiones de pinza, mayor será la fructificación.

(7) Prueba de fructificación: El cultivo madre obtenido a partir del aislamiento de tejido debe pasar una prueba de fructificación para confirmar su normalidad antes de que pueda utilizarse a gran escala.